補(bǔ)骨脂素能逆轉(zhuǎn)白血病細(xì)胞MDR

多藥耐藥（MDR）是腫瘤臨床化療失敗的主要原因之一，克服MDR是目前腫瘤防治研究中的熱點(diǎn)。暨南大學(xué)藥學(xué)院和遼寧大學(xué)環(huán)境與生命科學(xué)學(xué)院的研究人員在發(fā)現(xiàn)補(bǔ)骨脂素具有化療增敏作用的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)，補(bǔ)骨脂素能逆轉(zhuǎn)白血病細(xì)胞阿霉素耐藥株（K562/ADR）的MDR，其機(jī)理與抑制P-糖蛋白（P-gp）的功能及其表達(dá)，增加細(xì)胞內(nèi)阿霉素（ADR）的積累有關(guān)。

自從Biedle等發(fā)現(xiàn)MDR現(xiàn)象以來(lái)，現(xiàn)有的研究結(jié)果表明多種機(jī)制參與腫瘤細(xì)胞多藥耐藥形成，主要包括細(xì)胞膜P-gp、多藥耐藥相關(guān)蛋白過(guò)度表達(dá)形成藥物外輸泵，使抗癌藥物在腫瘤細(xì)胞內(nèi)蓄積下降；谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（GST）單獨(dú)或與谷胱甘肽（GSH）一起參與多種細(xì)胞毒代謝及解毒過(guò)程；與細(xì)胞凋亡相關(guān)的因子及基因如bcl-2、p53等異常。

國(guó)內(nèi)外針對(duì)上述環(huán)節(jié)進(jìn)行了廣泛研究以尋求拮抗和/或逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞MDR的方法，體外被證實(shí)具有逆轉(zhuǎn)耐藥活性的化合物或生物制劑很多，但真正進(jìn)入臨床研究的只有異搏定、環(huán)孢菌素A等極少數(shù)，而且療效不甚理想。目前還沒(méi)有一種藥物或方法在臨床被廣泛接受，現(xiàn)有逆轉(zhuǎn)劑大多為“老藥新用”，逆轉(zhuǎn)耐藥往往不是其主要功能，臨床使用禁忌癥多，毒副作用大。

研究人員采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法（MTT）檢測(cè)藥物細(xì)胞毒性作用，以高效液相色譜法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)阿霉素（ADR）的濃度，以流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞P-gp的表達(dá)，觀察補(bǔ)骨脂素對(duì)體外培養(yǎng)的K562/ADR的作用。結(jié)果顯示，補(bǔ)骨脂素（1～20微摩爾/升）能不同程度地降低ADR對(duì)K562/ADR細(xì)胞的半數(shù)有效濃度；20微摩爾/升能顯著提高ADR在K562/ADR細(xì)胞內(nèi)的濃度，降低K562/ADR細(xì)胞P-gp的表達(dá)。

研究人員介紹，補(bǔ)骨脂辛、苦、溫，具有補(bǔ)腎精、溫腎陽(yáng)功效，在協(xié)同化療治療腫瘤疾患中，無(wú)論單味藥還是中藥復(fù)方常被選為中藥增敏劑應(yīng)用于臨床。其主要成分之一補(bǔ)骨脂素為呋喃香豆素類化合物，對(duì)多種小鼠肉瘤、艾氏腹水瘤、肝癌等有生長(zhǎng)抑制和體外細(xì)胞毒作用；臨床觀察表明，以補(bǔ)骨脂素為主要成分的藥物有明確的逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥的作用。

本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)骨脂素能增強(qiáng)ADR對(duì)耐藥株K562/ADR的殺傷作用，表明補(bǔ)骨脂素能逆轉(zhuǎn)MDR；測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ADR積累情況能反映出藥物對(duì)P-gp功能泵的影響狀況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明補(bǔ)骨脂素與ADR合用3小時(shí)后，能顯著增強(qiáng)K562/ADR細(xì)胞內(nèi)ADR的積累，表明補(bǔ)骨脂素能抑制P-gp功能而減少藥物的外排，從而提高了K562/ADR 細(xì)胞內(nèi)ADR的濃度，提高了化療藥物的效果，但其抑制P-gp的表達(dá)程度和P-gp泵的功能的相關(guān)機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。