單克隆抗體技術(shù)在中藥研究中的應(yīng)用初探

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，單克隆抗體技術(shù)已不單單是制備動物（包括人）體內(nèi)生化物質(zhì)的抗體，它已被引領(lǐng)和發(fā)展到自然界的植物學(xué)，特別是臨床中草藥研究領(lǐng)域的應(yīng)用，從而開創(chuàng)了單克隆抗體應(yīng)用的新領(lǐng)域。近日，西北師范大學(xué)生命科學(xué)院馬瑞君教授指出，單克隆抗體技術(shù)是上世紀發(fā)展起來的一種高科技創(chuàng)新技術(shù)，特別是近年來，它在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)及臨床研究上得到了普遍的應(yīng)用，并發(fā)揮了重要作用。由于單克隆抗體是由同一個B細胞克隆產(chǎn)生的，并具有純度高、特異性強、利于實驗、標(biāo)準(zhǔn)化及可大量生產(chǎn)供應(yīng)等優(yōu)點，因而在中醫(yī)藥研究領(lǐng)域，有著廣闊的發(fā)展空間。

利于分析中藥有效成分

近年來，中藥現(xiàn)代化研究大多集中在單味中藥有效成分的研究上，如大環(huán)結(jié)構(gòu)的抗癌物質(zhì)、多糖、皂苷及黃酮等化合物。而對中藥復(fù)方作用機制的研究，也必須建立在其藥效成分的了解之上。因此，對中藥活性成分的分離純化、結(jié)構(gòu)測定、定向誘導(dǎo)有效活性成分的生成及新劑型、新工藝等方面，都離不開生物工程技術(shù)。單克隆抗體技術(shù)作為一種成熟的生物工程技術(shù)，在解決這些關(guān)鍵性問題中，均具有不可替代的作用和優(yōu)勢。有研究表明，中草藥中的一些有效成分如蛋白質(zhì)、多酞等，既能刺激機體引起免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，又能與抗體發(fā)生特異結(jié)合，被稱之為“完全抗原”。因此，單克隆抗體技術(shù)不單純是制備某種動物（包括人）體內(nèi)生化物質(zhì)的抗體，它在植物學(xué)特別是中草藥領(lǐng)域的研究應(yīng)用，有著廣泛的前景和空間。我國是世界上中草藥最豐富的國家，在長期的實踐中已形成了獨特的理論體系，并積累了豐富的臨床經(jīng)驗。為此，我國不僅具有利用中草藥研發(fā)新藥的優(yōu)勢，而且為單克隆抗體技術(shù)在中草藥研究中的應(yīng)用，提供得天獨厚的條件和基礎(chǔ)。

相關(guān)研究促進其應(yīng)用

隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展，單克隆抗體技術(shù)在中醫(yī)藥的研究應(yīng)用中，已呈多層面多渠道的發(fā)展態(tài)勢。

用于對藥物原材料的檢測分析。目前，中藥原材料同名異物、同物異名或同種植物不同組織中，有效成分含量差別很大。如果能得到某種中草藥有效成分的單克隆抗體，就可應(yīng)用放射免疫或PCR分析法，對不同植物的有效成分進行檢測，并判斷出該植物中的成分及含量。如日本研究人員制備抗人參皂苷的單克隆抗體，對人參屬植物根部的粗提取物中的人參皂苷，進行質(zhì)和量的檢測分析；又如美國研究人員利用單克隆抗體及免疫檢測法，對中草藥中的小檗堿含量進行定量分析，均取得了成功。

制備免疫親和柱，用于提取高純度的有效成分。免疫親和色譜柱是將抗體通過連接臂結(jié)合在固相的介質(zhì)上，這種固相化的抗體將只和與其有生物特異親和性的抗原分子相結(jié)合，其他生物分子因不被吸附而流出色譜柱，從而達到分離純化之目的。由于免疫親和譜利用的是生物學(xué)特性，其選擇性強，純化效率高，可一步獲得滿意的純化效果。目前，美國已用抗人參皂苷抗體制作免疫親和色譜柱，成功提取高純度的人參皂苷。

建立藥物分析法，用于生產(chǎn)質(zhì)量的控制。在藥物生產(chǎn)過程中，采用生物檢測或物理化學(xué)檢測法，往往需要幾克或幾十克的材料，經(jīng)過反復(fù)提取、分離和純化方可得到供檢測的樣品，且需要價格昂貴的儀器設(shè)備。而單克隆抗體免疫分析技術(shù)，可直接測定微量樣品的某一種或幾種物質(zhì)，具有靈敏精確、迅速簡便等優(yōu)點。國外藥商十分看好這一研發(fā)技術(shù)。

單克隆有效成分抗體，用于中藥真?zhèn)舞b定。加強中藥的鑒別，是確保中藥原藥材和制劑質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。物理、化學(xué)、生物學(xué)、紫外線、高效液相以及免疫學(xué)等檢測技術(shù)的發(fā)展，已成為一個先進的鑒別體系。然而，以單克隆抗體作為基礎(chǔ)的免疫分析技術(shù)，更顯其獨特的優(yōu)勢。如將藥物有效成分的單克隆抗體開發(fā)成試劑盒化，僅憑借其簡單的顯色反應(yīng)，即可對藥物的真假做出正確的判斷。目前，國外已有這種免疫色譜條帶檢測技術(shù)問世。此外，單克隆抗體還可開發(fā)成治療藥物，利用其抗原抗體的特異性反應(yīng)，對體內(nèi)的中藥毒性成分進行中和，發(fā)揮生物活性作用，恢復(fù)患者健康。

總之，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們對單克隆抗體技術(shù)的認識在不斷深化，在我國的中藥現(xiàn)代化中，將有廣泛的應(yīng)用前景，并發(fā)揮出不可替代的作用。

相關(guān)鏈接：

單克隆抗體：抗體主要由B淋巴細胞合成。每個B淋巴細胞有合成一種抗體的遺傳基因。動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系，含遺傳基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當(dāng)機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成該細胞的子孫，即克隆由許多個被激活B細胞的分裂增殖形成多克隆，并合成多種抗體。如果能選出一個制造一種專一抗體的細胞進行培養(yǎng)，就可得到由單細胞經(jīng)分裂增殖而形成的細胞群，即單克隆。單克隆細胞將合成僅含一種決定簇的抗體，稱為單克隆抗體。

單克隆抗體技術(shù)的基本原理：要制備單克隆抗體需先獲得能合成專一性抗體的單克隆B淋巴細胞，但這種B淋巴細胞不能在體外生長。實驗發(fā)現(xiàn)，骨髓瘤細胞可在體外生長繁殖，應(yīng)用細胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細胞與免疫的淋巴細胞二者合二為一，得到雜種的骨髓瘤細胞。這種雜種細胞繼承兩種親代細胞的特性，它既具有B淋巴細胞合成專一抗體的特性，也有骨髓瘤細胞能在體外培養(yǎng)增殖永存的特性，用這種來源于單個融合細胞培養(yǎng)增殖的細胞群，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體。