外排泵抑制劑研究進(jìn)展不斷

隨著抗生素和化療藥物的發(fā)展和在臨床上的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌和腫瘤細(xì)胞也產(chǎn)生了各種各樣的耐藥性，其中主動(dòng)外排就是主要機(jī)制之一。外排泵的過度表達(dá)使藥物外排增加，細(xì)胞體內(nèi)藥物濃度下降，臨床療效降低或無效。外排泵抑制劑不僅可以抑制耐藥細(xì)菌和腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的外排，恢復(fù)其對(duì)藥物的敏感性，提高耐藥細(xì)菌和腫瘤的臨床治療效果，而且在改善某些藥物的藥動(dòng)學(xué)特性（如提高口服藥物的吸收，降低肝、腎清除率）方面也有廣泛的用途。近年來，外排泵抑制劑的研究取得了較大的進(jìn)展。

ATP水解能驅(qū)動(dòng)型新品頻頻出現(xiàn)

根據(jù)藥物外排機(jī)制的不同，主動(dòng)外排系統(tǒng)可分ATP水解能驅(qū)動(dòng)型外排泵和跨膜質(zhì)子梯度能驅(qū)動(dòng)型外排泵兩大類。

ATP水解能驅(qū)動(dòng)型外排泵抑制劑的共同特點(diǎn)是，通過抑制ATP結(jié)合膜糖蛋白實(shí)現(xiàn)其逆轉(zhuǎn)活性。根據(jù)抑制劑與膜糖蛋白結(jié)合的特異性以及親和性大小，目前ATP水解能驅(qū)動(dòng)型外排泵抑制劑已有三代產(chǎn)品出現(xiàn)。

*第一代抑制劑

該類外排泵抑制劑與膜糖蛋白結(jié)合的特異性與親和性不高，在臨床上有各自的適應(yīng)證，且抑制劑量較高，副作用明顯，從而在臨床上的應(yīng)用受限。代表藥物有利血平（reserpine）、維拉帕米（verapamil）、環(huán)孢素A（CsA）、他莫昔芬（tamoxifen）和托瑞米芬（toremifen）等。

維拉帕米是發(fā)現(xiàn)較早的多重耐藥逆轉(zhuǎn)劑，但其逆轉(zhuǎn)活性不強(qiáng)，由于心血管系統(tǒng)的不良反應(yīng)限制了其在臨床上的應(yīng)用。國(guó)外研究人員對(duì)四氧代二噻烷和二噻烷維拉帕米衍生物進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)：這兩類化合物在谷胱苷肽存在時(shí)，某些化合物如RO11-3651和RO11-2751表現(xiàn)出強(qiáng)的抑制外排作用；四氧代二噻烷維拉帕米衍生物（RO11-3651除外）沒有活性，且其他位的結(jié)構(gòu)修飾也不能改善其外排作用，這表明四氧代二噻烷基可能不利于化合物與多重耐藥相關(guān)蛋白1（MRP1）發(fā)生相互作用。脂溶性的大小可能是影響這兩類化合物抑制MRP1活性最重要的因素。

托瑞米芬和他莫昔芬是三苯基乙烯類雌激素拮抗劑。他莫昔芬的逆轉(zhuǎn)活性比托瑞米芬強(qiáng)，但體內(nèi)耐受性較差。研究表明，短期、高劑量托瑞米芬與長(zhǎng)春新堿合用，耐受性良好，可有效地逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥（MDR）。

*第二代抑制劑

該類抑制劑代表藥物有：PSC833(Valspodar)、VX-710（biricodar，incel）、MS-209、GF120918和右旋維拉帕米（dexverapamil）等。

PSC833是環(huán)孢素D的衍生物，活性比CsA高，且沒有CsA的免疫抑制作用。PSC833和米托蒽醌（mitoxantrone）、依托泊甙(etoposide)、阿糖胞苷（Cytarabine）聯(lián)合治療急性骨髓白血病，在多中心二期臨床試驗(yàn)中獲得較好的評(píng)價(jià)。

VX-710為哌啶類衍生物，是廣譜外排泵抑制劑，對(duì)P-糖蛋白（P-gp）和MRP1同時(shí)具有抑制作用。VX-710和紫杉醇（paclitaxel）聯(lián)合治療耐藥卵巢癌二期評(píng)價(jià)的結(jié)果表明：它可以恢復(fù)耐藥腫瘤對(duì)紫杉醇的敏感性，且安全性和耐受性較好。

MS-209是一個(gè)新穎的喹啉衍生物，與化療藥物聯(lián)合用藥可以逆轉(zhuǎn)耐藥人小細(xì)胞肺癌（SCLC）的耐藥性，并且能夠抑制其多組織轉(zhuǎn)移。

GF120918是一個(gè)合成的吖啶類P-gp介導(dǎo)的多藥耐藥抑制劑。GF120918和阿霉素聯(lián)合應(yīng)用治療固體瘤一期臨床研究和藥理學(xué)研究表明：不論在體外還是體內(nèi)試驗(yàn)中，其均可抑制P-gp，且副作用較小。

該類抑制劑與第一代相比，有較高的膜糖蛋白親和性，且沒有第一代抑制劑所具有的藥理學(xué)活性，但卻能引起復(fù)雜的藥物相互作用，在臨床上的應(yīng)用還待深入研究。

*第三代抑制劑

該類抑制劑與前兩代抑制劑相比，具有較高的抑制活性和選擇性，并且克服了第二代抑制劑與藥物相互作用的缺點(diǎn)，不影響藥物的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，臨床應(yīng)用前景廣闊。目前，處于研究之中的藥物有LY335979、XR9576和OC144-093等。

LY335979為喹啉類衍生物，是一個(gè)高效、高選擇性的P-gp抑制劑。它對(duì)P-gp有很高的親和力，但不是P-gp的底物，在抑制P-gp的濃度下不抑制MRP，與阿霉素合用治療晚期惡性腫瘤的一期臨床試驗(yàn)已經(jīng)完成。

XR9576是鄰氨基苯甲酸衍生物，可以特異性地抑制P-gp。不論口服還是靜脈給藥，其均可發(fā)揮持續(xù)的抑制作用，并且耐受性良好，已經(jīng)通過一期臨床安全性評(píng)價(jià)。

OC144-093是新的咪唑類化合物，其本身沒有細(xì)胞毒性，在低劑量下就可逆轉(zhuǎn)耐藥癌細(xì)胞對(duì)阿霉素、長(zhǎng)春新堿等的耐藥性。國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)：2位取代基中的弱酸（COOH）或中性（OH）取代基為活性必需基團(tuán)；N-1位的取代基團(tuán)增大不利于提高M(jìn)DR的抑制能力，還會(huì)影響C-5位苯環(huán)的空間構(gòu)象；咪唑C-4位苯環(huán)對(duì)位取代基的大小也影響化合物對(duì)MDR的活性。

表面活性劑是一種特殊的P-gp抑制劑，它們能改變P-gp的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)，從而使其喪失活性。表面活性劑（如聚乙二醇、吐溫80和cremophorEL）能作用于Caco-2細(xì)胞膜，改變其流動(dòng)性，使細(xì)胞攝入藥物更加容易，但對(duì)該類化合物的研究仍然停留在體外實(shí)驗(yàn)階段。

此外，有些學(xué)者從植物中發(fā)現(xiàn)多種有抑制外排泵活性的天然產(chǎn)物，如綠茶多酚、澤瀉醇、衛(wèi)矛科倍半萜等，從中有希望得到有益的結(jié)構(gòu)提示。

跨膜質(zhì)子梯度能驅(qū)動(dòng)型研究逐漸深入

近年來，對(duì)跨膜質(zhì)子梯度能驅(qū)動(dòng)型外排泵抑制劑的研究也逐漸深入，取得了可喜的進(jìn)展。如研究發(fā)現(xiàn)，5'-MHC(5'-methoxyhydnocarpin)單獨(dú)用藥無抗菌活性，但與抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)能完全抑制MDR的外排作用。還有研究表明：3-OH取代可能對(duì)P-gp抑制發(fā)揮一定的作用，但不利于對(duì)NorA外排泵的抑制；7-OH取代不會(huì)影響化合物的抑制活性，但活性最高的化合物A環(huán)上沒有-OH取代；4-OMe或4-OH取代物，其脂溶性的改變對(duì)化合物的活性影響不大。令人驚奇的是，一些簡(jiǎn)單的烷基化黃酮也表現(xiàn)出強(qiáng)的MDR泵的抑制活性。

MC-207,110和MC-02,595是二肽類廣譜外排泵抑制劑，研究表明：該類化合物抑制效力與肽無關(guān)，只要具有雙陽離子且脂溶性相似，就可以抑制MDR的外排作用；化合物的脂溶性與毒性相關(guān)；鳥氨酸是影響毒性的重要基團(tuán)。在上述研究的基礎(chǔ)上，國(guó)外研究人員等用生物等排體精氨酸替換鳥氨酸，合成了MC-04,124，其活性與MC-02,595相似，而毒性只有原來的1/4。

13-CPTC是四環(huán)素經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾得到的一個(gè)具有抑制外排作用的化合物，其半數(shù)有效濃度（IC50）值在0.4～1.0微摩爾/升。它與Tet(B)蛋白有很高的親和性，可以與四環(huán)素競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合外排位點(diǎn)。

Ro07-3149可以非競(jìng)爭(zhēng)性地抑制耐藥細(xì)菌外排四環(huán)素，在25毫克/升時(shí)可以增加細(xì)胞內(nèi)四環(huán)素的濃度，且在8毫克/升時(shí)可將四環(huán)素的最小抑菌濃度（MIC）降低一半。曾有人對(duì)Ro07-3149結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，但沒有發(fā)現(xiàn)更好的化合物。

INF392是Markham等從小分子庫中篩選出的具有抑制NorA活性的化合物之一，在其濃度顯著低于利血平的情況下（0.6毫克/升）就可將環(huán)丙沙星的IC50降低至原來的1/2~1/3。

此外，氰氯苯腙（CCCP）為質(zhì)子動(dòng)力解偶聯(lián)劑和新型制酸劑，包括雷貝拉唑（rabeprazole）、奧美拉唑(omeprazole)、蘭索拉唑(lansoprazole)等，均能抑制質(zhì)子梯度外排泵的外排作用。

主動(dòng)外排系統(tǒng)參與的藥物耐藥性給臨床治療帶來不便，而外排泵抑制劑有望成為恢復(fù)藥物敏感性、提高臨床療效的一類新藥，其在提高口服藥物的生物利用度方面的應(yīng)用目前已經(jīng)成為藥物研究的熱點(diǎn)，相信在不久的將來會(huì)有更多優(yōu)秀的外排泵抑制劑問世。