胃癌耐藥細(xì)胞特異性結(jié)合短肽篩選成功

第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院消化病研究所日前用噬菌體環(huán)7肽庫成功篩選到能特異性結(jié)合胃癌耐藥細(xì)胞株的短肽，為腫瘤治療或藥物靶向治療奠定了基礎(chǔ)。

胃癌化療失敗的主要原因之一是腫瘤在化療中出現(xiàn)多藥耐藥現(xiàn)象。胃癌細(xì)胞在化療藥物長期持續(xù)作用下，不僅膜表面原有的某些分子發(fā)生高表達(dá)，而且出現(xiàn)許多未知新分子，這些變化均與耐藥密切相關(guān)。如何克隆這些未知的分子，闡明其在多藥耐藥發(fā)生中的機(jī)制，并阻斷其作用，已成為逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥研究的一個(gè)熱點(diǎn)。

為獲得與胃癌耐藥細(xì)胞株SGC7901/VCR特異結(jié)合的抑制耐藥短肽，作為提高胃癌化療效果的先導(dǎo)化合物，研究人員以SGC7901/VCR細(xì)胞為靶細(xì)胞，胃黏膜永生化上皮細(xì)胞GES、胃癌藥敏細(xì)胞SGC7901為吸附細(xì)胞對噬菌體環(huán)7肽庫進(jìn)行了消減篩選，用細(xì)胞ELSA鑒定陽性噬菌體克隆并測序，利用競爭抑制試驗(yàn)確定陽性克隆的結(jié)合部位是否為外源性肽段。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過4輪篩選，從隨機(jī)挑選的30個(gè)噬菌體克隆中得到14個(gè)能特異性與SGC7901/VCR結(jié)合而不與胃癌藥敏細(xì)胞結(jié)合的陽性克隆，確定其氨基酸序列分別為SY1（命名為Ph1）和SY2（命名為Ph2）。

進(jìn)一步分析篩選獲得Ph1的多肽序列發(fā)現(xiàn)，除了其兩端構(gòu)成二硫健的為疏水性氨基酸之外，中間插入的7個(gè)氨基酸中有5個(gè)是親水性氨基酸。這些氨基酸的表面概率值均較高，也就是說明這些氨基酸表面更容易暴露于溶液中，提示該親水多肽容易形成折曲的抗原表位。因而其與靶分子結(jié)合時(shí)，類似于受體-配體的結(jié)合，親和力高，這為設(shè)計(jì)小分子肽疫苗以及作為載體與藥物提供了參考依據(jù)。