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據(jù)中國醫(yī)藥報陜西訊 近日,西安交通大學第二醫(yī)院檢驗科何謙博士等在一項陜西省科學技術研究發(fā)展計劃項目基金課題研究中,成功研發(fā)出丙型肝炎病毒(HCV)不同片段抗體蛋白芯片檢測新技術。該技術的問世,為丙型肝炎患者的確診、獻血人員的篩選及治療藥物的研發(fā)等,提供了先進的檢測手段。
據(jù)介紹,近年來,國內外對HCV的檢測技術已越來越先進,如應用聚合酶鏈反應(PCR)、基因芯片等。目前,美國已采用RIBA3.0試劑檢測技術。因此,研發(fā)HCV抗體蛋白芯片檢測技術,已成為科研人員關注的熱點。
蛋白芯片檢測技術是伴隨基因芯片發(fā)展起來的新技術,它是將蛋白質的分析微縮到小型芯片上,利用熒光或酶顯色進行檢測,并通過電腦程序分析從而得出準確結果。研制中,何謙博士等首先獲取HCV融合抗原及分片段抗原,點樣于醛基化玻片上,制成HCV不同片段抗體蛋白芯片,通過重復性、穩(wěn)定性、特異性試驗及抗-HCV的ELISA試劑法和目前國際最先進的RIBA試劑法對比,觀察評估蛋白芯片的檢測率和準確率。
結果發(fā)現(xiàn),對20例陽性標本進行重復和穩(wěn)定性試驗檢測,新鮮包被的蛋白芯片與正常對照組結果一致;對20份類風濕因子陽性血清標本進行特異性試驗,陰性率達100%。同時還發(fā)現(xiàn),經對99例蛋白芯片的融和抗原檢測,其與國內ELISA試劑法相比,陰性符合率為93.8%,陽性符合率為97.1%;蛋白芯片分片段檢測與國際RIBA試劑法相比,其陽性符合率為98.5%,陰性符合率為100%。提示蛋白芯片法與ELISA、RIBA試劑法檢測結果相比,不僅有良好的一致性(P<0.05),而且優(yōu)于其他兩種檢測方法。
另據(jù)研究人員介紹,在HCV檢測中,加強和擴大對HCV不同編碼區(qū)的抗體檢測,是近年來該領域研究的一個新熱點,它直接關系到檢測技術的準確率和應用率。因編碼區(qū)含混合抗原,由于不同抗原組合時,抗原片段濃度不同,造成抗原配伍不適合或抗原相互干擾,從而影響抗原簇位點的充分暴露,造成漏檢現(xiàn)象。本研究表明,蛋白芯片檢測與其他肝炎病毒抗體無交叉反應,可降低假陽性發(fā)生,試劑穩(wěn)定性可達1年,在抗體檢測、疾病診斷及藥物研發(fā)中,均顯示出快速、高效、高通量信息處理等優(yōu)勢和良好的應用前景。
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據(jù)中國醫(yī)藥報陜西訊 近日,西安交通大學第二醫(yī)院檢驗科何謙博士等在一項陜西省科學技術研究發(fā)展計劃項目基金課題研究中,成功研發(fā)出丙型肝炎病毒(HCV)不同片段抗體蛋白芯片檢測新技術。該技術的問世,為丙型肝炎患者的確診、獻血人員的篩選及治療藥物的研發(fā)等,提供了先進的檢測手段。
據(jù)介紹,近年來,國內外對HCV的檢測技術已越來越先進,如應用聚合酶鏈反應(PCR)、基因芯片等。目前,美國已采用RIBA3.0試劑檢測技術。因此,研發(fā)HCV抗體蛋白芯片檢測技術,已成為科研人員關注的熱點。
蛋白芯片檢測技術是伴隨基因芯片發(fā)展起來的新技術,它是將蛋白質的分析微縮到小型芯片上,利用熒光或酶顯色進行檢測,并通過電腦程序分析從而得出準確結果。研制中,何謙博士等首先獲取HCV融合抗原及分片段抗原,點樣于醛基化玻片上,制成HCV不同片段抗體蛋白芯片,通過重復性、穩(wěn)定性、特異性試驗及抗-HCV的ELISA試劑法和目前國際最先進的RIBA試劑法對比,觀察評估蛋白芯片的檢測率和準確率。
結果發(fā)現(xiàn),對20例陽性標本進行重復和穩(wěn)定性試驗檢測,新鮮包被的蛋白芯片與正常對照組結果一致;對20份類風濕因子陽性血清標本進行特異性試驗,陰性率達100%。同時還發(fā)現(xiàn),經對99例蛋白芯片的融和抗原檢測,其與國內ELISA試劑法相比,陰性符合率為93.8%,陽性符合率為97.1%;蛋白芯片分片段檢測與國際RIBA試劑法相比,其陽性符合率為98.5%,陰性符合率為100%。提示蛋白芯片法與ELISA、RIBA試劑法檢測結果相比,不僅有良好的一致性(P<0.05),而且優(yōu)于其他兩種檢測方法。
另據(jù)研究人員介紹,在HCV檢測中,加強和擴大對HCV不同編碼區(qū)的抗體檢測,是近年來該領域研究的一個新熱點,它直接關系到檢測技術的準確率和應用率。因編碼區(qū)含混合抗原,由于不同抗原組合時,抗原片段濃度不同,造成抗原配伍不適合或抗原相互干擾,從而影響抗原簇位點的充分暴露,造成漏檢現(xiàn)象。本研究表明,蛋白芯片檢測與其他肝炎病毒抗體無交叉反應,可降低假陽性發(fā)生,試劑穩(wěn)定性可達1年,在抗體檢測、疾病診斷及藥物研發(fā)中,均顯示出快速、高效、高通量信息處理等優(yōu)勢和良好的應用前景。