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植物中存在著大量結(jié)構(gòu)與雌激素相似,能結(jié)合并激活哺乳動(dòng)物和人類的雌激素受體,并具有雌激素樣活性的有效成分。這些化學(xué)成分富含于某些中藥之中,如黃芪、黃芩、三七、柴胡、白果、麥冬、仙鶴草、蘆薈、木賊、虎杖、羅布麻、金錢草、魚腥草、陳皮等都含有黃酮和異黃酮類成分;桑白皮、陳皮、甘草、滿山紅、紫花杜鵑中含有二氫黃酮;槐花、紫菀、銀杏葉、滿山紅葉中含有黃酮醇;補(bǔ)骨脂、蛇床子、白芷、前胡、獨(dú)活、茵陳、秦皮等都含有香豆素;五味子、連翹、牛蒡子、細(xì)辛等含木脂素等。
有關(guān)雌激素的腦保護(hù)作用,一直是國(guó)內(nèi)外神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。選用富含雌激素成分的中藥組成復(fù)方,進(jìn)行腦保護(hù)作用的研究是新的研究思路?!吨袊?guó)臨床康復(fù)》2004年第8卷第34期報(bào)道了南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院張博生、徐運(yùn)等對(duì)含雌激素中藥腦保護(hù)作用的研究成果。目的旨在探討含雌激素中藥對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物缺血后腦損傷的保護(hù)作用及其臨床意義。
方法:選用健康成年雄性SD清潔級(jí)大鼠30只。動(dòng)物隨機(jī)分為兩組:對(duì)照組15只,中藥組15只。中藥制備:按黃芪∶三七∶黃芩∶麥冬(5∶1∶1∶1)比例稱取藥物,常法煎煮,60℃水浴濃縮成2g/mL藥液備用。試劑用兔抗雌激素受體。
動(dòng)物模型制作:分別給予飲用水、中藥胃灌注7天后,采用一側(cè)大腦中動(dòng)脈線栓法制成局灶性腦缺血再灌注模型。大鼠經(jīng)氯氨酮80mg/kg腹腔注射麻醉,頸部切口,游離頸外動(dòng)脈,電凝切斷其分支動(dòng)脈,并在遠(yuǎn)處結(jié)扎。尼龍線由頸外動(dòng)脈經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈插入大腦前動(dòng)脈以阻塞大腦中動(dòng)脈起始處,出現(xiàn)局灶性神經(jīng)功能缺損的為模型制備成功。缺血2小時(shí)后再灌注,12小時(shí)和24小時(shí)后處死。每組6只取腦切片,TTC染色,計(jì)算梗死面積。其余取缺血側(cè)皮質(zhì),提取蛋白,準(zhǔn)備作雌激素受體β測(cè)定。
評(píng)估標(biāo)準(zhǔn):腦梗死面積測(cè)定:將大鼠斷頭取腦。將腦迅速置于-80℃冰箱中冷凍,2小時(shí)后取出,切成1mm厚的腦片,置于質(zhì)量濃度為20g/L的TTC中染色,37℃孵育30分鐘。選擇每一切片的尾側(cè)面用HPIAS1000高清晰度圖像處理系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析,測(cè)量每片的梗死面積。免疫印跡蛋白測(cè)定:提取的蛋白溶解在2XSDS凝膠緩沖液中,然后煮沸5分鐘。在質(zhì)量濃度為40~200g/L聚丙烯酰胺凝膠上電泳。轉(zhuǎn)到PVDF膜上。浸在質(zhì)量濃度為50g/L牛奶/TBST室溫1小時(shí),去除非特異性結(jié)合。加兔抗雌激素受體后測(cè)定其蛋白表達(dá)。洗膜后再用actin抗體,作為標(biāo)本量定量。
主要觀察指標(biāo):用雌激素受體β蛋白表達(dá)的條帶密度與actin表達(dá)的條帶密度之比為雌激素受體的實(shí)際表達(dá)量。
結(jié)果顯示:中藥組腦梗死面積再灌注12小時(shí)時(shí)為40.62±1.68%、再灌注24小時(shí)時(shí)為58.89±2.12%,與對(duì)照組相比,差異有顯著性意義(p<0.05);免疫印跡蛋白測(cè)定,中藥處理組缺血側(cè)腦皮質(zhì)雌激素受體表達(dá)高于空白對(duì)照組。
研究人員指出:黃芪、三七、黃芩、麥冬均富含黃酮和異黃酮,其是具有雌激素樣活性的有效成分。黃芪又是治療腦卒中的傳統(tǒng)名方補(bǔ)陽還五湯的主藥,其對(duì)腦卒中的治療有肯定的療效。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,缺血2小時(shí)后再灌注12小時(shí)和24小時(shí),與對(duì)照組相比,中藥組腦梗死面積明顯小于空白對(duì)照組,并有顯著意義。說明本中藥復(fù)方有明顯的腦保護(hù)作用。
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植物中存在著大量結(jié)構(gòu)與雌激素相似,能結(jié)合并激活哺乳動(dòng)物和人類的雌激素受體,并具有雌激素樣活性的有效成分。這些化學(xué)成分富含于某些中藥之中,如黃芪、黃芩、三七、柴胡、白果、麥冬、仙鶴草、蘆薈、木賊、虎杖、羅布麻、金錢草、魚腥草、陳皮等都含有黃酮和異黃酮類成分;桑白皮、陳皮、甘草、滿山紅、紫花杜鵑中含有二氫黃酮;槐花、紫菀、銀杏葉、滿山紅葉中含有黃酮醇;補(bǔ)骨脂、蛇床子、白芷、前胡、獨(dú)活、茵陳、秦皮等都含有香豆素;五味子、連翹、牛蒡子、細(xì)辛等含木脂素等。
有關(guān)雌激素的腦保護(hù)作用,一直是國(guó)內(nèi)外神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。選用富含雌激素成分的中藥組成復(fù)方,進(jìn)行腦保護(hù)作用的研究是新的研究思路?!吨袊?guó)臨床康復(fù)》2004年第8卷第34期報(bào)道了南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院張博生、徐運(yùn)等對(duì)含雌激素中藥腦保護(hù)作用的研究成果。目的旨在探討含雌激素中藥對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物缺血后腦損傷的保護(hù)作用及其臨床意義。
方法:選用健康成年雄性SD清潔級(jí)大鼠30只。動(dòng)物隨機(jī)分為兩組:對(duì)照組15只,中藥組15只。中藥制備:按黃芪∶三七∶黃芩∶麥冬(5∶1∶1∶1)比例稱取藥物,常法煎煮,60℃水浴濃縮成2g/mL藥液備用。試劑用兔抗雌激素受體。
動(dòng)物模型制作:分別給予飲用水、中藥胃灌注7天后,采用一側(cè)大腦中動(dòng)脈線栓法制成局灶性腦缺血再灌注模型。大鼠經(jīng)氯氨酮80mg/kg腹腔注射麻醉,頸部切口,游離頸外動(dòng)脈,電凝切斷其分支動(dòng)脈,并在遠(yuǎn)處結(jié)扎。尼龍線由頸外動(dòng)脈經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈插入大腦前動(dòng)脈以阻塞大腦中動(dòng)脈起始處,出現(xiàn)局灶性神經(jīng)功能缺損的為模型制備成功。缺血2小時(shí)后再灌注,12小時(shí)和24小時(shí)后處死。每組6只取腦切片,TTC染色,計(jì)算梗死面積。其余取缺血側(cè)皮質(zhì),提取蛋白,準(zhǔn)備作雌激素受體β測(cè)定。
評(píng)估標(biāo)準(zhǔn):腦梗死面積測(cè)定:將大鼠斷頭取腦。將腦迅速置于-80℃冰箱中冷凍,2小時(shí)后取出,切成1mm厚的腦片,置于質(zhì)量濃度為20g/L的TTC中染色,37℃孵育30分鐘。選擇每一切片的尾側(cè)面用HPIAS1000高清晰度圖像處理系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析,測(cè)量每片的梗死面積。免疫印跡蛋白測(cè)定:提取的蛋白溶解在2XSDS凝膠緩沖液中,然后煮沸5分鐘。在質(zhì)量濃度為40~200g/L聚丙烯酰胺凝膠上電泳。轉(zhuǎn)到PVDF膜上。浸在質(zhì)量濃度為50g/L牛奶/TBST室溫1小時(shí),去除非特異性結(jié)合。加兔抗雌激素受體后測(cè)定其蛋白表達(dá)。洗膜后再用actin抗體,作為標(biāo)本量定量。
主要觀察指標(biāo):用雌激素受體β蛋白表達(dá)的條帶密度與actin表達(dá)的條帶密度之比為雌激素受體的實(shí)際表達(dá)量。
結(jié)果顯示:中藥組腦梗死面積再灌注12小時(shí)時(shí)為40.62±1.68%、再灌注24小時(shí)時(shí)為58.89±2.12%,與對(duì)照組相比,差異有顯著性意義(p<0.05);免疫印跡蛋白測(cè)定,中藥處理組缺血側(cè)腦皮質(zhì)雌激素受體表達(dá)高于空白對(duì)照組。
研究人員指出:黃芪、三七、黃芩、麥冬均富含黃酮和異黃酮,其是具有雌激素樣活性的有效成分。黃芪又是治療腦卒中的傳統(tǒng)名方補(bǔ)陽還五湯的主藥,其對(duì)腦卒中的治療有肯定的療效。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,缺血2小時(shí)后再灌注12小時(shí)和24小時(shí),與對(duì)照組相比,中藥組腦梗死面積明顯小于空白對(duì)照組,并有顯著意義。說明本中藥復(fù)方有明顯的腦保護(hù)作用。