對(duì)中藥制劑工藝研究評(píng)價(jià)指標(biāo)的淺見

提取效果的好壞直接關(guān)系到產(chǎn)品質(zhì)量，在研究過程中如何評(píng)價(jià)提取工藝的優(yōu)劣，用什么作評(píng)價(jià)指標(biāo)，便成了研究工作中一個(gè)很重要的問題，設(shè)計(jì)時(shí)須先行選擇好。提取工藝的評(píng)價(jià)指標(biāo)應(yīng)是提取有效成分質(zhì)和量的代表，也是提取物臨床作用性質(zhì)和強(qiáng)度的代表，對(duì)于一、二類中藥新藥所用的提取物——有效成分或有效部位來講，評(píng)價(jià)指標(biāo)較好選擇。有效成分可直接測其量，有效部位中的主要有效成分也與療效有直接量效關(guān)系，可以代表。但對(duì)三、四類新藥來講，大復(fù)方成分多，各中藥成分不太清楚，作用亦不一樣，用什么作評(píng)價(jià)指標(biāo)呢?很難選擇。目前提取工藝研究中常用以下項(xiàng)目作評(píng)價(jià)指標(biāo)。1　化學(xué)方法

化學(xué)方法是用提取物中的成分含量多少評(píng)價(jià)提取效果，此法量化程度高，表述清楚，也易于操作，且耗資較少。但復(fù)方提取物或單味提取的有效部位選什么成分才能代表其質(zhì)量呢?藥品提取物的質(zhì)量即指臨床療效的好壞，也就是說所選成分其作用性質(zhì)、量效關(guān)系都應(yīng)與復(fù)方的功能主治保持一致。這點(diǎn)太難，中藥復(fù)方本來就是利用各藥的綜合療效，一個(gè)復(fù)方里有若干成分，很難找到一個(gè)成分，它的作用完全與功能主治一致，可以作為真正的代表。一般可用多指標(biāo)評(píng)價(jià)：1.1　水浸出物

《中藥新藥研究指南》提出：“在研究提取工藝中對(duì)提取效果的評(píng)價(jià)，不宜單純用浸膏中總固體量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，因總固體量的高低往往并不代表提取效果的優(yōu)劣。”眾所周知，水的溶解范圍很廣，再加熱促使各種分子運(yùn)動(dòng)加劇以及沸騰的攪拌作用，直接攪拌的作用，使各種成分及微粒都進(jìn)入煎液中。相同重量的藥材，當(dāng)藥材質(zhì)地較軟(如花、葉、全草等)，含糖分、淀粉、粘液質(zhì)重(如熟地、山藥、黃柏等)，而煎煮時(shí)加水量多，火大，煎熬時(shí)間長，其干膏收率一定比常規(guī)條件下提取量高得多，實(shí)際上有效成分含量并不一定比常規(guī)條件下提取的量多，所以它與功能主治的療效強(qiáng)度不成量效關(guān)系，不能僅用它作提取工藝的評(píng)價(jià)指標(biāo)。但在工藝研究中水提干膏率這個(gè)指標(biāo)還是要的，有它的用途：a.作選擇劑型的參考指標(biāo)；b.作考查工藝水平的評(píng)價(jià)指標(biāo)；c.作固體制劑日服量、單服劑量及包裝規(guī)格確定的依據(jù)。所以，無論單因素篩選或正交試驗(yàn)，都應(yīng)將水提干膏收率列入計(jì)劃。

1.2　有機(jī)溶劑浸出物

根據(jù)中藥制劑是應(yīng)用多種成分的總體作用治病的原則，可按處方多數(shù)主要藥物的主要有效成分溶解性質(zhì)，選擇適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶媒進(jìn)行浸提，用此提取物作評(píng)價(jià)篩選工藝。如處方藥物含有揮發(fā)性的當(dāng)歸、川芎、荊芥、薄荷等，或含烏頭堿的生川烏、生草烏等，因它們都易溶于乙醚，則可以用乙醚浸出物作提取工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)，若處方藥物多含生物堿，可用氯仿浸出物作提取工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)；若處方藥物多含皂甙，可用正丁醇浸出物作提取工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)；但常見的是既含生物堿，又含甙類，也有黃酮、蒽醌等成分，因它們都能溶解于較高濃度的乙醇，所以用70%或80%或85%乙醇浸出物作提取工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)。這種指標(biāo)盡管較粗，專屬性不強(qiáng)，但有以下特點(diǎn)：第一，含雜質(zhì)少，有效成分多，且與療效有直接關(guān)系；第二，操作簡便，不需特殊儀器，易于普及，目前應(yīng)用較多。

1.3　大類成分

以方中主要藥物的某類具有一定療效的成分(如總生物堿、總黃酮、總甙、總蒽醌、總多糖……)的提取量作提取效果的評(píng)價(jià)指標(biāo)。如某處方以大黃為君藥時(shí)，可以1，8-二羥基蒽醌為對(duì)照品，用比色法測其提取物中總蒽醌含量，作為評(píng)價(jià)指標(biāo)；當(dāng)處方以黃連、黃柏為主要藥物時(shí)，可用滴定法測其提取物中總生物堿含量作評(píng)價(jià)指標(biāo)；當(dāng)處方中有銀杏葉、槐花、菖蒲等藥物時(shí)，可以蘆丁為對(duì)照品，用比色法測其提取物中總黃酮含量作評(píng)價(jià)指標(biāo)；當(dāng)處方中有黨參、黃芪、黃精、玉竹時(shí)，可將其提取物進(jìn)一步水解后測其葡萄糖或果糖，以單糖計(jì)其總多糖含量，用總多糖作提取效果的評(píng)價(jià)指標(biāo)。這種指標(biāo)操作簡便，不須特殊的大型檢測儀器，普通實(shí)驗(yàn)室里都能完成，且所得數(shù)據(jù)基本上與療效有量效關(guān)系，在一定程度上可以代表提取物的質(zhì)量。

1.4　指標(biāo)成分

《中藥新藥研究指南》(第26頁)對(duì)提取工藝研究的評(píng)價(jià)指標(biāo)有明確意見：“可采用處方內(nèi)某藥味的指標(biāo)成分在提取物中的總量作為評(píng)價(jià)指標(biāo)”。為了節(jié)省人力、物力、財(cái)力及時(shí)間，為了前后保持一致，為了使指標(biāo)成分更具代表性，作為工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)的成分最好與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中含量測定成分保持一致。根據(jù)《中藥新藥指導(dǎo)原則》規(guī)定應(yīng)首選：“處方中君藥(主藥)、貴重藥、毒藥”的主要有效成分或指標(biāo)成分作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，這種指標(biāo)表述清楚，但這是從復(fù)方中測定單體成分的含量，其技術(shù)水平、儀器設(shè)備要求高，實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)使用多，且難于成功。其次，中藥復(fù)方是利用綜合療效，很難找到某個(gè)成分能代表該復(fù)方的功能主治。不過從促進(jìn)中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展和提高中藥新藥的研究水平出發(fā)，這個(gè)工作是必須要做的。2　生物學(xué)方法

在研究工藝條件時(shí)，若各樣品間只存在有效成分?jǐn)?shù)量的差距，用化學(xué)法評(píng)價(jià)是比較恰當(dāng)?shù)?，但若由于工藝條件差別大，如不同溶劑，不同提取方式以及含熱敏、光敏成分或有效成分不清楚的藥物等等，試驗(yàn)中制出的樣品間不僅存在同類有效成分量的差別，而且存在不同種類的有效成分，或者復(fù)方中成分復(fù)雜而某個(gè)指標(biāo)成分不能代表其療效者，最好用生物學(xué)方法作工藝研究評(píng)價(jià)指標(biāo)。因?yàn)樯飳W(xué)方法體現(xiàn)在：(1)整體制劑所含全部成分的綜合作用；(2)與臨床作用接近，它對(duì)療效更具評(píng)價(jià)力。生物學(xué)方法目前應(yīng)用最多的有微生物學(xué)方法和藥理學(xué)方法。

2.1　微生物學(xué)方法

一些清熱解毒的藥物，或外用消毒殺菌的藥物可用最小抑菌濃度來作提取效果的指標(biāo)。

2.2　藥理學(xué)方法

根據(jù)處方的功能主治選擇最主要藥效學(xué)指標(biāo)來評(píng)價(jià)提取工藝的優(yōu)劣。如紫抗注射液用藥物對(duì)HCT-8及K562細(xì)胞毒效力作評(píng)價(jià)指標(biāo)。3　有效組分——綜合評(píng)價(jià)

前述化學(xué)方法與生物學(xué)方法皆各有所長，但單獨(dú)使用皆不夠全面和理想，根據(jù)筆者研究經(jīng)驗(yàn)，將化學(xué)方法與生物學(xué)方法結(jié)合起來，發(fā)揮各自優(yōu)點(diǎn)，可找出產(chǎn)生復(fù)方功能主治作用的物質(zhì)的主要部分——有效組分，用它作評(píng)價(jià)指標(biāo)，更具科學(xué)性和合理性。因它既包含復(fù)方的作用又包含有產(chǎn)生作用的物質(zhì)。

中藥復(fù)方有效組分的研究要點(diǎn)如下：

3.1　將中藥復(fù)方藥物用系統(tǒng)溶劑法的各溶劑以極性從小到大依次進(jìn)行提取制備出相對(duì)應(yīng)的樣品。

3.2　根據(jù)復(fù)方的功能主治，選擇2～3個(gè)最具代表性的藥效指標(biāo)，對(duì)各樣品作平行藥效試驗(yàn)，篩選出作用最強(qiáng)的樣品，即有效組分。

3.3　對(duì)有效組分進(jìn)行化學(xué)分析，找出有效成分及其含量測定方法。如枕中健腦液，方中含人參、黃芪、遠(yuǎn)志、石菖蒲等藥。它的有效組分的研究，我們采取的方法是：

(1)用石油醚-乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水的溶劑系統(tǒng)，用此五種溶劑依次對(duì)枕中健腦液全方藥物進(jìn)行提取，制備出A、B、C、D、E五個(gè)相對(duì)應(yīng)樣品。

(2)根據(jù)功能主治，用了兩個(gè)藥效學(xué)試驗(yàn)項(xiàng)目：A對(duì)模型小鼠學(xué)習(xí)、記憶能力的影響；B對(duì)模型大鼠組織中乙酰膽堿酯酶活性、神經(jīng)遞質(zhì)DA和NE含量影響?？疾榱薃、B、C、D、E五個(gè)樣品的作用。試驗(yàn)結(jié)果：C組分-正丁醇浸出物藥效最好。故確定正丁醇浸出物為該復(fù)方的有效組分。

(3)分析C組分，并結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，人參皂甙是其有效成分，故建立了該組分中人參二醇的含量測定方法。

所以，枕中健腦液工藝研究的全過程皆用正于醇浸出物和人參二醇含量作評(píng)價(jià)指標(biāo)。4　工程及經(jīng)濟(jì)指標(biāo)

利用生產(chǎn)的可操作性、可行性及成本作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。

以上指標(biāo)各有其獨(dú)到之處，如水浸出物，可直接影響固體制劑的服量與劑型選擇，影響液體制劑的澄清度與穩(wěn)定性；有效組分與療效的量效關(guān)系更為密切，直接影響制劑的有效性；指標(biāo)成分技術(shù)含量高，一定程度上表明工藝研究現(xiàn)代水平。為了提高中藥復(fù)方工藝的科學(xué)性、合理性和可行性，最好用多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)。為了平衡指標(biāo)間的差異，多指標(biāo)的各分指標(biāo)宜用權(quán)重系數(shù)(按指標(biāo)作用主次分配)加以調(diào)節(jié)。如生脈飲提取工藝條件篩選，方法選L9(34)，評(píng)價(jià)指標(biāo)可選(1)水浸出物×10%；(2)正丁醇浸出物(有效組分)×50%；(3)人參皂甙Rg1×40%。